1、《角色肖清芳》由《乔红》饰演。肖清芳，蛇灵领袖，曾任朝中内卫府大阁领。袁天罡因洛河惊现八卦碑之事败露，被朝廷拘捕，蛇灵大权从此落入她的手中。肖清芳经过十年苦心经营，将蛇灵发展成为拥有二十二堂口以及两千徒众的庞大组织，占据幽州、崇州两地，在千牛卫与内卫中都有自己的人手，野心勃勃为夺取天下。
2、《角色王孝杰》由《严燕生》饰演。王孝杰，武则天爱将，官拜右威卫大将军。性格暴躁、狂妄但却忠诚、勇敢、耿直而且勇于认错。崇州案中，王孝杰被部将苏宏晖、崇州刺史丘静等陷害，为契丹俘虏，后被李元芳所救，遂与李元芳、狄仁杰成为生死之交。后来在蛇灵案中，王孝杰率右威卫主力攻破太子宫，击破蛇灵逆党，救出了狄仁杰。
4、《角色丘静》由《》饰演。
9、《角色杨方》由《》饰演。
10、《角色仁阔》由《》饰演。
14、《角色哈日勒》由《》饰演。
16、《角色孙副将》由《》饰演。
17、《角色乌骑施》由《》饰演。
18、《角色武三思》由《》饰演。
21、《角色袁天罡》由《邵万林》饰演。袁天罡，蛇灵创始人，为人城府极深，博学多才，天文地理、机关术算无所不精。他知道肖清芳威望已非自己可比，便与心腹鲁成互换身份，并利用狄仁杰消灭肖清芳。狄仁杰为了得知洛河神异的真相，以身做饵。果不其然，袁天罡在得意之下将洛河神异的日期说出。最后一场混战，袁天罡被擒，一杯毒酒，结束了一代枭雄的一生。
23、《角色苏显儿替身》由《》饰演。
25、《角色狄仁杰》由《梁冠华》饰演。狄仁杰，字怀英，他为官如老子所言“圣人无常心，以百姓心为心”：为了拯救无辜，他敢于拂逆君主之意，始终保持体恤百姓、不畏权势的本色，始终是居庙堂之上，以民为忧，后人称之为“唐室砥柱”；他任掌管刑法的大理丞，到任一年，判决了大量的积压案件，涉及到一万七千余人，其中没有一人上诉申冤，其处事公正可见一斑。 ；
26、《角色李元芳》由《张子健》饰演。李元芳，狄仁杰的卫队长，二人在观众眼中是一对完美搭档。李元芳武艺高强，擅使链子刀（轻钢柳叶刀）、幽兰剑。他义薄云天，凛然正气，桀傲、果断、严守礼仪，却也有孩子气的调皮、纯朴。李元芳虽不是主人公，但他已经有了主人公的魅力，使人们对其念念不忘。
28、《角色曾泰》由《须乾》饰演。曾泰，狄仁杰的学生，也是除狄仁杰和李元芳之外出场最多的人物。他原本是“梅花内卫”成员之一，经狄仁杰开导，弃暗投明投入狄仁杰门下。尽管曾泰没有狄仁杰准确迅速的推理能力，但他无论是做什么，总是尽职尽责、任劳任怨，是狄仁杰办案时的得力助手，本剧中是不可或缺的人物。
29、《角色武则天》由《吕中》饰演。 ；武则天，中国历史上唯一的女皇帝。执掌朝政长达半个世纪。作为至高无上的女皇，身处于权力之巅的她，知人善任，杀伐决断，精明睿智，颇具治国之才；又心狠手辣，多疑善变，任用酷吏。总之，武则天是一个复杂的政治家形象。
30、《角色吉利可汗》由《徐晓贝》饰演。吉利可汗，突厥国的可汗，但在因权力之争遭人暗算，有国难回。当他知道狄仁杰来到幽州后，化名李二试探狄仁杰的人品，狄仁杰却提前推理出了他的身份，当他发现狄仁杰是一个为国为民的好人时，才将自己的一切说出。
42、《角色方丈》由《》饰演。
44、《角色林永忠》由《》饰演。
45、《角色锦娘》由《》饰演。
47、《角色温开》由《》饰演。
51、《角色吴顺》由《》饰演。
53、《角色黄文越》由《》饰演。
54、《角色县丞》由《》饰演。
