1、《角色Peter Parker / Spider-Man》由《安德鲁·加菲尔德》饰演。蜘蛛侠
2、《角色Gwen Stacy》由《艾玛·斯通》饰演。彼得初恋女友
3、《角色Dr. Curt Connors / The Lizard》由《瑞斯·伊凡斯》饰演。蜥蜴博士
4、《角色Ben Parker》由《马丁·辛》饰演。彼得伯父
5、《角色May Parker》由《莎莉·菲尔德》饰演。彼得伯母
6、《角色Flash Thompson》由《克里斯·泽尔卡》饰演。常常欺负蜘蛛侠(未变身)的同学
7、《角色George Stacy》由《丹尼斯·利瑞》饰演。警官，格温的父亲
8、《角色Mrs. Van Adder》由《安妮·帕里西》饰演。
9、《角色Richard Parker》由《坎贝尔·斯科特》饰演。彼得父亲
10、《角色Stan the Librarian》由《斯坦·李》饰演。图书馆管理员
11、《角色Nels Van Adder / Proto-Goblin》由《伊尔凡·可汗》饰演。博士助手
12、《角色Missy Kallenback》由《汉娜·马克斯》饰演。
14、《角色Ray》由《》饰演。
17、《角色HarryOsborn；GreenGoblin》由《戴恩·德哈恩》饰演。
